Präanalytik für die Mikrobiologie

Abstrich dünn mit Flüssigmedium (flexibel)

1 Tupfer

• antimikrobielle Augentropfen und Salben vorher absetzen
• möglichst keine Lokalanästhetika vor Abstrichentnahme
• nach Abheben des Unterlides Konjunktiva mit angefeuchtetem Abstrichtupfer (sterile physiologische Kochsalzlösung) abstreichen
• V. a. mykotische Keratitis subepitheliales Material vom Ulkusrand
   

Hinweis Acanthamoeben-Keratitis

• Abstrich ungeeignet!
• Hornhautmaterial aus tiefer Abrasio, Kontaktlinsen und Behälter mit Kontaklinsenflüssigkeit

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6h

Konjunktivitis
Hornhautulkus
Keratitis
Keratitis durch Acanthamoeben

Kultur
PCR

2-7 Werktage

Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer

• geschlossene Bläschen mit einer sterilen Kanüle aufstechen
• Tupfer mehrfach über das offene Bläschen streichen
• keine gesunde Haut berühren
  (Kontamination Hautflora)

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6h

infektiöse bullöse Hauterkrankungen

Kultur
PCR

2-7 Werktage

1) Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)
 • geeignet für Kultur + PCR
2) Abstrich cobas PCR Medium (starr)
 • ausschließlich geeignet für CT/GO-PCR

1 Tupfer

• nach Spekulum-Einstellung zunächst Entfernung von Schleimauflagerungen und des Abflusses am Muttermund
• Abstrichtupfer ca. 1-2 cm tief in den Zervixkanal einführen und wieder herausziehen ohne die Vaginalschleimhaut zu berühren

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

bakterielle Vaginose
Kolpitis
Zervizitis
sexuell übertragbare Krankheiten (STD)
Screening Streptokokken Gruppe B

Kultur
PCR

2-7 Werktage

1) Abstrich dünn mit Flüssigmedium (flexibel)
 • geeignet für Kultur + PCR
2) Abstrich cobas PCR Medium
 • ausschließlich geeignet für CT/GO-PCR

1 Tupfer

• Abnahme morgens vor der ersten Miktion oder 2-3 Stunden nach der letzten Miktion
• nach vorsichtiger Reinigung der Harnröhrenmündung einen dünnen Tupfer vorsichtig ca. 2 cm in die Urethra vorschieben und leicht drehen
• vorsichtig wieder herausziehen

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

sexuell übertragbare Krankheiten (STD)
Urethritis
Epididymitis
Prostatitis

Kultur
PCR

2-7 Werktage

Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer

• Hautstellen vorher nicht desinfizieren oder reinigen
• mit dem Tupfer mehrfach über das betroffene Hautareal streichen

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

Screening multiresistente-Erreger
(MRSA, VRE, MRGN)

Kultur

2-7 Werktage

Abstrich GynoPrep PCR Medium

1 Transportröhrchen ohne Abstrichbürste

• Schleimreste vom Muttermund und der umliegenden Schleimhaut mit Reinigungstupfer entfernen
• Zervix-Abstrichbürste in den Endozervikalkanal einführen, einmal im Uhrzeigersinn drehen
• Bürste vorsichtig zurückziehen, dabei Kontakt mit Vaginalschleimhaut vermeiden
• Bürste ins Transportgefäß überführen und mehrfach drehen um Zellmaterial zu lösen
• Abstrichbürste verwerfen
• ausschließlich das Transportgefäß fest verschlossen einsenden

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 12 h

Screening HPV-assoz. Zervixkarzinom

Targetamplifikationstest

5 Werktage

1 Tupfer

• mehrfaches Drehen des Tupfers beim Abstreichen
• Aussagekraft für Diagnostik der Sinusitis nur eingeschränkt
  • Aussagen über Infektionserreger mittels tiefem Abstrich (insb. bei Sinusitis maxillaris)
  • nur mit flexiblem Tupfer durchführen

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

Nachweis von MRE Kolonisation
nasale Läsionen
Sinusitis (tiefer Abstrich)
bakterielle, virale, atypische Atemwegsinfektionen
Pertussis

Kultur
PCR
 • Multiplex-Resp23 + ggfs. Pertussis

2-7 Werktage

1) Abstrich dünn mit Flüssigmedium (flexibel)
2) Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer

• möglichst bis zum Nasopharynx vorschieben
• Abstreichen durch mehrfaches Drehen des Tupfers
   

MRSA-Screening

• mit dem starren Tupfer beide Nasenvorhöfe + beide Rachensegel abstreichen

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

bakterielle, virale, atypische Atemwegsinfektionen
Pertussis

MRSA-Screening

Kultur
PCR
 • Multiplex-Resp23 + ggfs. Pertussis

2-7 Werktage

Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer

Gehörgangsabstrich

• Ohrmuschel desinfizieren
• evtl. Krusten entfernen
• Gehörgang mit Tupfer rotierend abstreichen

Mittelohrpunktionen und Parazentesen

• Trommelfell geschlossen:
  Gehörgang säubern,
  Trommelfell punktieren bzw. inzidieren,
  Flüssigkeit aseptisch aspirieren
• Trommelfell ruptiert: Untersuchungsmaterial direkt mit einem Tupfer unter Zuhilfenahme eines Spekulums gewinnen

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

Otitis media (akut, chronisch)
Otitis externa

Kultur
PCR

2-4 Werktage
V.a. Otomykose: bis zu 4 Wochen

Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer

• Abstreichen von Tonsillen oder Seitensträngen unter Drehen und kräftigem Andrücken
• Kontamination der Probe mit Bakterien der physiologischen Rachenflora vermeiden

Diphtherie

• Sekret unter der abgehobenen Pseudomembran und ggf. vom Kehlkopf entnehmen
• Verdacht auf Begleitschein vermerken und Meldepflicht beachten

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

Tonsillopharyngitis und Scharlach
Diphtherie
bakterielle, virale, atypische Atemwegsinfektionen
Pertussis
orale Candidose

Kultur
PCR
 • Multiplex-Resp23 + ggfs. Pertussis
Toxinnachweis

2-4 Werktage

Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer

• Tupfer rektal einführen, idealerweise sollte Stuhl am Tupfer anhaften
• nicht geeignet bei V.a. Gastroenteritis

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

Screening auf Multiresistente-Erreger
(MRSA, VRE, MRGN)
Screening auf Chinolonresistenz vor Prostatabiopsie

Kultur

2-7 Werktage

Abstrich dick mit Flüssigmedium (starr)

1 Tupfer
ggfs. mehrere Tupfer, Gewebe, Aspirate bei komplexen Wunden je nach Wundbeschaffenheit

• geschlossene Eiterprozesse:
  • perkutane Punktion des Abszesses, erregerhaltiges Material mit einer Spritze aufziehen
  • nach Abszessspaltung Wundabstrich von Abszesswand
• offene Wunden:
  Wundreinigung mit sterilem Tupfer, Material aus den Randbezirken und vom Wundgrund mit einem sterilen Abstrichtupfer entnehmen
• Fisteln:
  Entfernen des oberflächlich austretenden Sekrets, Fistelöffnung mit Alkohol desinfizieren, Material aus der Tiefe des Fistelganges (Aspiration oder Kürette) gewinnen
• Art der Wunde auf dem Anforderungsschein vermerken (z.B. Biss-, Verbrennungs-, Diabeteswunde)

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Lagerung bei 2-8°C, wenn >6 h

Hautgewebeinfektionen
Weichteilgewebeinfektionen

Kultur

2-4 Werktage

steriles Röhrchen (15 ml)
oder Probengefäß aus Absaugsystem

15 ml

• Aspiration von Sekret aus den tiefen Abschnitten des Bronchialbaums mit einem sterilen Katheter
• Gewinnung möglichst unmittelbar nach Trachealtubuswechsel

• Lagerung gekühlt 4 - 8°C
• Abholung innerhalb 12 h

bakterielle, virale, atypische Infektionen der oberen und unteren Atemwege
Tracheitis
Mukoviszidose
Tuberkulose

Kultur
PCR
 • Multiplex-Resp23 + ggfs. Pertussis

2-4 Werktage

steriles Probengefäß (100 ml)

min. 10 ml

• Sputumuntersuchung unter oder kurz nach Antibiose ist nicht sinnvoll
• möglichst als Morgensputum nach dem Aufwachen gewinnen
• Gewinnung vor dem Einsetzen eventueller Zahnprotesen durchführen
• Mund vor Entnahme gründlich mit abgekochtem Wasser spülen
• eitriges Sekret aus der Tiefe direkt in den Becher abhusten, nötigenfalls durch Inhalation stimulieren
• nur makroskopisch eitriges Material einsenden, sonst ggf. Neugewinnung
• induziertes Sputum nach Inhalation von ca. 25 ml steriler hyperosmolarer (3 - 15%) Kochsalzlösung mittels Ultraschallvernebler (Inhalationsdauer 15-20 Minuten, dabei Sputum mehrfach in das Gefäß expektorieren)

• Lagerung gekühlt 4-8°C
• Abholung innerhalb 6 h

bakterielle, virale, atypische Infektionen der oberen und unteren Atemwege
Tracheitis
Mukoviszidose
Tuberkulose

Kultur
PCR
 • Multiplex-Resp23 + ggfs. Pertussis

2-4 Werktage

steriles Röhrchen (15 ml)
oder Probengefäß aus Absaugsystem

15 ml

Bronchialsekret

• Gewinnung durch Bronchoskopie
• erste Aspirationsprobe nach Einführen des Bronchoskops verwerfen
• Sekret möglichst nah am vermuteten Infektionsort entnehmen
• keine anästhesierenden Gele verwenden (können antimikrobiell wirken)
   

BAL

• Sekret nach Instillation von Ringer-Laktat-Lösung über das Bronchoskop aspirieren
• erste Aspirationsprobe nach Einführen des Bronchoskops verwerfen
• 5-10 ml Flüssigkeit entnehmen

• Lagerung gekühlt 4-8°C
• Abholung innerhalb 6 h

bakterielle, virale, atypische Infektionen der oberen und unteren Atemwege
Tracheitis
Mukoviszidose
Tuberkulose

Kultur
PCR
 • Multiplex-Resp23 + ggfs. Pertussis
 • Pneumocystis jirovecii bei BAL

2-4 Werktage

1) BACT/ALERT BK-Flaschen aerob/anaerob
2) BACT/ALERT Pädiatrie BK-Flasche
    (Säuglinge/Neugeborene)

Erwachsene/Kinder >20 kg      8-10 ml
Kinder <20 kg                          1-10 ml
Säuglinge und Neugeborene   0,5-1,5 ml

• Blutkulturen müssen möglichst vor Beginn der Antibiotikatherapie abgenommen werden
• Kontamination mit Hautflora durch konsequente Desinfektion der Haut und BK-Flaschen vermeiden!
• möglichst aus peripherer Vene entnehmen
• immer aerobe und anaerobe Flasche beimpfen
• Entnahme von 3x 2 Flaschen zu unterschiedlichen Zeitpunkten
  • Nachweisrate steigt mit der Zahl der abgenommenen Blutkulturen!
• Gummimembran mit der Spritze durchstechen
• Blutprobe in die Flasche injizieren, jeweils mit anaerober Beimpfung beginnen
• Flasche nach Injektion gut durchmischen
• Angaben auf dem Anforderungsschein ergänzen (Verdachtsdiagnose, Entnahmeort, aktuelle antimikrobielle Therapie, usw)
• V.a. Katheter-/Portinfektion:
  zu jedem Zeitpunkt eine Entnahme aus dem ZVK/Port plus eine Entnahme periphere Vene
  (2x 2 Pärchen Blutkulturen)

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 16 h

Fieber unklarere Genese
Sepsis oder septischer Schock
V.a. Endokarditis
Pneumonie
Osteomyelitis
Meningitis
Spondylodiscitis
Abszesse
Phlegmonen
V. a. Fremdkörperinfektion
zyklische Infektionskrankheiten (z.B. Typhus oder Paratyphus) u.v.a.

Kultur
Mikroskopie bei positiven Blutkulturen

Kultur:           bis zu 7 Werktage
Mikroskopie: unmittelbar nach positivem Signal

1) BD Vacutainer EDTA-Röhrchen
2) Saarstedt EDTA-Röhrchen

2 ml

V.a. Blutparasiten z.B. Malaria

• Probe immer telefonisch voranmelden
• mehrmalige Abnahmen empfehlenswert,
  unabhängig vom Fieberanstieg
• Wiederholung der Untersuchung alle 24h:
  Negatives Ergebnis schließt Malaria nicht sicher aus!
• Vorstellung in der Tropenambulanz empfohlen
• Blut bei der Abnahme langsam ins Röhrchen fließen lassen, um Hämolyse zu vermeiden
• Röhrchen danach einige Sekunden vorsichtig schwenken
   

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h
• Einsendung immer am Abnahmetag!

Fieber nach Auslandsaufenthalt
V.a. Blutparasiten z.B. Malaria

virale Hepatitis
HIV-Infektion
CMV-/EBV-Infektion

Malaria-Mikroskopie
PCR: qualitativ und quantitativ

PCR qualitativ:             1-2 Werktage
PCR quantitativ:           1x wöchentlich
Malaria-Mikroskopie:    am Einsendetag

Probengefäß steriles Röhrchen (15 ml)

1 Katheterspitze pro Röhrchen (ca. 4-6 cm)

• Insertionsstelle gründlich desinfizieren
• beim Herausziehen des Katheters unbedingt Kontakt der Spitze mit der Haut und anderem unsterilem Material verhindern
• Katheterspitze mit steriler Schere vorsichtig abschneiden und ins Gefäß geben
• V. a. Katheter-assoziierte Bakteriämie: Immer gemeinsam mit Blutkulturen einsenden!
• Keine Routineuntersuchungen bei geplanter Katheterentfernung!

• Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung innerhalb 6 h

V.a. Katheter-assoziierte Infektion
z.B. ZVK, Portssysteme, externe Ventrikeldrainagen

Kultur

2-4 Werktage

sterile Box je nach Implantat-Größe:
2 l rechteckig; 1,1 l rechteckig; 600 ml rund

vollständiges Implantat ohne Transportmedium

• Explantation des Implantates und Überführung in eine passende sterile Box im OP
   

• Lagerung bei Raumtemperatur

• umgehender Transport

V.a. Knocheninfektion z.B. Osteomyelitis

Mikroskopie
Sonikation und Kultur

4-14 Werktage

sterile Box je nach Implantat-Größe:
2 l rechteckig; 1,1 l rechteckig; 600 ml rund

vollständiges Implantat ohne Transportmedium

• Explantation des Implantates und Überführung in eine passende sterile Box im OP
   

• Lagerung bei Raumtemperatur

• umgehender Transport

V.a. Prothesen- und Implantatinfektion

Mikroskopie
Sonikation und Kultur

4-14 Werktage

steriles Röhrchen mit Entnahmelöffel

1/3 des Röhrchens bei festem Stuhl
2-3 ml bei flüssigem Stuhl

• Stuhl in ein sauberes Gefäß oder frisch gereinigte Toilette entleeren
• schleimige und/oder blutige Bestandteile bevorzugt aufnehmen
   

V.a. Parasitose

• 1 Entnahme an 3 aufeinander folgenden Tagen

• Lagerung gekühlt 2-8°C
• Abholung innerhalb 12 h

Gastroenteritis
Bauchschmerzen
Durchfall nach Antibiose
Parasitose
Helicobacter pylori

Kultur
Mikroskopie
PCR

2-4 Werktage

Perianales Abklatschpräparat:
Objektträger mit Klarsicht-Klebestreifen

mind. 3 Abklatschpräparate

• Abnahme am Morgen nach dem Aufstehen
• vor Abnahme des perianalen Abklatschpräparates keine Reinigung des Perianalbereiches
• Klebestreifen über Analbereich kleben, anschließend auf Objektträger befestigen
• bei Nachweis sind enge Kontaktpersonen (z. B. im Kindergarten, Familienmitglieder) ebenfalls zu untersuchen

• Lagerung bei Raumtemperatur

analer Juckreiz
V.a. Enterobius vermicularis
(Oxyuren, Madenwürmer)

Mikroskopie

1 Werktag

1) keimarmes Röhrchen universal  
 • Mykoplasmendiagnostik
2) cobas PCR Urine Röhrchen
 • ausschließlich geeignet für CT/GO-PCR

je nach Röhrchen 10-20 ml

• erster Morgenurin
  (min. 1 h nicht urinieren)
• 20 - 30 ml Erststrahlurin in konservierungsmittelfreien Urinsammelbecher auffangen
• Urin in das entsprechende Röhrchen überführen

• Mykoplasmendiagnostik:
  Lagerung bei 2-8°C
• cobas System:
  Lagerung bei Raumtemperatur
• Abholung am Entnahmetag

sexuell übertragbare Krankheiten (STD)
Urethritis

PCR

1 Werktag

1) keimarmes Röhrchen universal
2) Exactobac Urinröhrchen mit Stabilisator

je nach Röhrchen 10-20 ml

Einmalkatheterurin:

• Katheterisierung unter aseptischen Bedingungen
• Verbindung Katheter-Ableitungsschlauch nicht öffnen
   

Dauerkatheterurin:

• Membran der Entnahmestelle für Urinproben am Auffangbeutel desinfizieren
• Urin nur an dafür vorgesehener Entnahmestelle entnehmen!
   

Blasenpunktion:

• Punktion bei gefüllter Blase
• Punktionsstelle (zwischen unterem und mittleren Drittel der Verbindungslinie Symphyse/ Nabel) sorgfältig desinfizieren
• Bitte Art des Urins auf Anforderungsschein vermerken

• Universalröhrchen:
  Lagerung bei 2-8°C
• Exactobact System:
  Lagerung bei Raumtemperatur

Harnwegsinfekt
Pyelonephritis

Kultur

2-4 Tage

1) keimarmes Röhrchen universal
2) Exactobac Urinröhrchen mit Stabilisator

je nach Röhrchen 10-20 ml

Vorbereitung Mann:

• Hände und Vorhaut gründlich mit Seife reinigen
• Vorhaut zurückziehen
• Eichel mit milder Seifenlösung waschen
• mit sauberem Tupfer trocknen
   

Vorbereitung Frau:

• Äußeres Genital inkl. Damm gründlich mit Seife reinigen
• Spreizen der Labien
• Urethralmündung und Umgebung mit feuchten keimarmen Tupfern reinigen und trocknen lassen
• erstes Urindrittel ablaufen lassen
• 10 - 20 ml in sterilem Gefäß auffangen, ohne den Harnstrahl zu unterbrechen

• Universalröhrchen:
  Lagerung bei 2-8°C
• Exactobact System:
  Lagerung bei Raumtemperatur

Harnwegsinfekt
Pyelonephritis

Kultur
 

2-4 Tage